Opção referenciada nas principais portarias e métodos compendiais para a pesquisa de coliformes e Escherichia Coli em água fazendo o uso de substratos cromogênico/fluorogênico , oferecendo redução de custos para esta análise. Existem muitos protocolos (ISO/APHA/FARMACOPÉIA) para a pesquisa e quantificação de Escherichia Coli  e Coliformes, no entanto um dos mais sensíveis e práticos, com resultados precisos é o uso de substratos cromogênicos/fluorogênicos hidrolisáveis. Estes substratos utilizados em conjunto, são capazes de detectar, mesmo em quantidades mínimas, a presença de  coliformes e E. coli em uma amostra de água.     Nesse método, os coliformes totais produzem a enzima β-d-galactosidase, que cliva o substrato cromogênico presente no meio.    

Preparo:

1.Adicionar 3,735g do meio em 100ml da água que será analisada 2.Homogeneizar para ocorrer a solubilização do material 3.Incubar por 18-24 horas a 35-37°C. Interpretação ØApresentou coloração amarela: presença de Coliformes (ONPG positivo) ØNão apresentou coloração amarela: ausência de Coliformes (ONPG negativo)

Os materiais que apresentarem coloração amarela submeter à uma lâmpada de UV com comprimento de onda de 366 nm. Ø Apresentou fluorescência: confirmação de E. coli (MUG Positivo)